Gel Sephadex (G1-G200)

Gel Sephadex (G1-G200)

Sephadex là một loại gel được điều chế bằng cách liên kết ngang dextran với epichlorohydrin. Ứng dụng chính của nó là tách nhóm các phân tử trọng lượng thấp và cao. Khử muối là sử dụng phổ biến nhất. Khử muối bằng Sephadex tiết kiệm thời gian đáng kể, hệ số pha loãng thấp (có thể thấp tới 1,4: 1) và phục hồi hoạt động cao ngay cả với lượng mẫu rất nhỏ. Sephadex G-25 có sẵn được đóng gói sẵn trong các cột PD-10, lý tưởng cho công việc thường xuyên, nhanh chóng.

Các ứng dụng của Sephadex bao gồm hệ đệm trao đổi và loại bỏ các phân tử nhỏ trong quá trình điều chế các phân tử sinh học lớn, chẳng hạn như ampholytes, chất tẩy rửa, nhãn phóng xạ hoặc huỳnh quang và phenol (trong quá trình tinh chế DNA).

Sephadex được cung cấp ở dạng bột khô, và phải được trương nở trong hệ đệm dư thừa trước khi sử dụng. Lọc tất cả các bộ đệm thông qua bộ lọc 0,22-mm để giúp ngăn chặn sự phát triển của vi sinh vật.

1. Cân lượng Sephadex khô thích hợp cho theo thể tích yêu cầu. Nếu nhồi cột ở áp suất tối đa cho gel, chọn hệ số thể tích bed thấp nhất (mL/ g) để tính lượng Sephadex khô.
2. Thêm đủ ệm để bằng tổng khối lượng của cột cộng thêm 30%. Thời gian trương nở khác nhau tùy thuộc loại Sephadex. Quá trình này được tăng tốc bằng cách sử dụng bể nước sôi.
3. Sau khi trương nở xong, hãy bỏ phần nổi phía trên.
4. Thêm hệ đệm để 75% hỗn dịch.
5. Loại bỏ bọt khí trước khi nhồi.

Nhồi cột dựa theo trọng lực:

1. Đổ toàn bộ hạt vào cột trong một phần, chú ý không để có bọt khí.
2. Bắt đầu dòng trọng lực để bắt đầu nhồi cột.

Nhồi cột bằng bộ chuyển đổi dòng chảy:

Nhồi cột tốt là điều cần thiết để có được độ phân giải tốt. Lý tưởng nhất, cột phải được đóng gói ở áp suất cao nhất có thể mà không làm biến dạng các hạt. Đối với Sephadex G-10 – G-50, các hạt hoạt động như những quả cầu cứng. Dung sai áp suất của cột là hệ số giới hạn: đóng gói ở áp suất tối đa được chỉ định cho cột. Đối với các loại gel mềm hơn, Sephadex G-75 – G-200, phải cẩn thận hơn để tránh nén gel. Không tăng áp suất vượt quá các giá trị được cho trong Bảng 1. Với các cột rộng hơn, phải sử dụng áp suất vận hành tối đa giảm nhẹ. Tốc độ dòng chảy tỷ lệ nghịch với chiều cao: tăng chiều cao sẽ làm giảm tốc độ dòng chảy, nhưng không ảnh hưởng đến áp suất vận hành tối đa.

1. Sử dụng một bể chứa nếu cần thiết, đổ toàn bộ hạt trương nở vào cột trong một phần.
2. Khởi động máy bơm để bắt đầu đóng gói.
3. Khi tất cả gel đã lắng đọng vào cột, hãy tháo bình chứa.
4. Chèn một bộ chuyển đổi dòng chảy và nhồi hạt ở áp suất hoạt động tối đa của gel.
5. Sau khi gel được đóng gói kỹ lưỡng vào cột, điều chỉnh bộ điều hợp dòng chảy lên bề mặt của giường gel.
6. Cho thêm 2-3 lần thể tích bed sử dụng trong phần tách. Điều này làm ổn định và cân bằng.
7. Điều chỉnh lại bộ điều hợp dòng chảy lên bề mặt của gel.

Làm sạch hạt:

1. Rửa bằng hai thể tích cột NaOH 0,2 M hoặc dung dịch chất tẩy không ion. Rửa các loại Sephadex xốp hơn (G-50 – G-200) bằng NaOH nên được thực hiện bên ngoài cột vì gel sẽ phồng lên.
2. Cân bằng lại gel với 2-3 lần thể tích cột bằng đệm. Khi cần thiết, gel có thể được gỡ bỏ khỏi cột và khử trùng bằng nồi hấp ở 120.

Bảo quản:

Bảo quản gel khô chưa sử dụng ở 2- 8°C. Lưu trữ gel đã sử dụng ở 2-8°C trong ethanol 20% hoặc trong dung dịch chất ức chế tăng trưởng vi sinh vật như 0,002% Hibitane /chlorhexidine hoặc 0,02% natri azide.

Công Ty CP Đầu tư phát triển TM & DV Thùy Anh

ĐT / Zalo: 0339229221

Email: thietbithuyanh@gmail.com

Đ/c: N02F, Khu đô thị Mễ Trì Thượng, P. Mễ Trì, Q. Nam Từ Liêm, Hà Nội

Website: https://thietbiyduoc.vn/